高效液相色譜方法及應用（第三版）


	本書是“色譜技術叢書”中專門介紹高效液相色譜的分冊。書中從操作者的角度對高效液相色譜的分類發展與高效液相色譜儀器做了全面介紹，在此基礎上對液固色譜法和液液色譜法、正相和反相鍵合相色譜法、親水作用鍵合相色譜法、疏水作用鍵合相色譜法、微柱液相色譜法、二維高效液相色譜法等多種高效液相色譜方法的色譜分離條件、分析操作、實驗技術和注意事項等進行了詳細的闡述，並對梯度洗脫的原理和方法以及高效液相色譜法的基本理論做了系統介紹，總結了高效液相色譜新技術的進展。本次修訂根據高效液相色譜近年的發展對第二版內容做了大幅更新，新增了親水作用鍵合相色譜法、疏水作用鍵合相色譜法以及高效液相色譜新技術的進展三章，刪除了第二版中體積排阻色譜法和高效液相色譜分離條件的優化兩章。對其他各章增補了儀器、填料、理論和應用方面的進展和技術資料。本書適用於各領域中從事液相色譜分析工作的技術人員學習參考，也可作為高等院校分析化學及相關專業師生的教學參考書。



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	目錄第一章緒論第一節　高效液相色譜方法簡介 2 一、液相色譜技術的初現—茨維特的經典實驗 2 二、高效液相色譜方法的顯現 3 三、高效液相色譜方法的發展現狀 6 第二節　高效液相色譜方法的特點 13 一、與經典液相（柱）色譜法比較 13 二、與氣相色譜法比較 14 三、高效液相色譜法的特點 15 第三節　高效液相色譜方法的分類 15 一、按溶質在兩相分離過程的物理化學原理分類 15 二、按溶質在色譜柱洗脫的動力學過程分類 17 第四節　高效液相色譜法的應用範圍和局限性 19 一、應用範圍 19 二、方法的局限性 19 參考文獻 20 第二章　高效液相色譜儀簡介第一節　流動相及儲液罐 23 一、儲液罐 23 二、流動相脫氣 24 第二節　高壓輸液泵及梯度洗脫裝置 26 一、高壓輸液泵 26 二、輸液系統的輔助設備 39 三、梯度洗脫裝置 41 第三節　進樣裝置 44 一、停流進樣裝置 44 二、六通閥進樣裝置 45 三、自動進樣器 47 第四節　色譜柱 48 一、柱材料及規格 48 二、柱填料和柱壽命 49 三、保護柱 50 四、柱連接方式 51 五、柱溫控制 51 第五節　檢測器 52 一、檢測器的分類和回應特性 52 二、紫外吸收檢測器 54 三、折光指數檢測器 60 四、電導檢測器 62 五、螢光檢測器 63 六、蒸發光散射檢測器 64 七、帶電荷氣溶膠檢測器 68 八、多角度光散射檢測器 70 九、質譜檢測器 72 第六節　色譜資料處理裝置 81 一、手持控制器 81 二、化學工作站 81 第七節　高效液相色譜儀器的發展趨勢 82 一、從1969年到1992年 82 二、從1992年到2002年 83 三、從2002年到2012年 83 四、2012年到現在 84 參考文獻 88 第三章　液固色譜法和液液色譜法第一節　分離原理 90 一、吸附係數 90 二、分配係數 91 第二節　固定相 92 一、液固色譜固定相 92 二、液液色譜固定相 106 第三節　流動相 107 一、表徵溶劑特性的重要參數 109 二、液固和液液色譜的流動相 116 第四節　二元溶劑體系中液固和液液色譜的保留規律 117 一、溶質保留值的基本方程式 117 二、液固色譜的保留值方程式 118 三、液液色譜的保留值方程式 118 參考文獻 119 第四章　正相和反相鍵合相色譜法第一節　分離原理 120 一、正相鍵合相色譜法的分離原理 121 二、反相鍵合相色譜法的分離原理 121 第二節　固定相 123 一、鍵合固定相的製備及分類 123 二、鍵合固定相的性質 129 三、使用鍵合固定相應注意的問題 131 第三節　流動相 133 一、溶劑的選擇性分組 133 二、在鍵合相色譜分析中選擇流動相的一般原則 134 三、改善色譜分離選擇性的方法 138 四、多元混合溶劑的多重選擇性 140 五、由溶劑選擇性三角形描述混合溶劑組成的特性 143 六、溶質保留值隨溶劑極性變化的一般保留規律 143 七、用線性溶劑化自由能關係（LSER）來表徵反相液相色譜中溶質的保留值方程式 144 第四節　新型高效化學鍵合固定相 146 一、新型單齒鍵合固定相 146 二、新型雙齒鍵合固定相 148 三、雜化有機/無機粒子材料 149 四、氟化烷基和苯基固定相 152 五、反相/離子交換混合模式固定相 154 第五節　化學鍵合固定相分類方法簡介 157 一、Tanaka分類方法 158 二、Tanaka分類表徵方法 160 三、擴展Tanaka分類方法 161 第六節　離子對色譜法 166 一、分離原理 166 二、固定相、流動相和對（反）離子 167 三、影響離子對色譜分離選擇性的因素 168 參考文獻 171 第五章　親水作用鍵合相色譜法第一節　親水作用液相色譜的分離機理 176 一、分子極性 176 二、分離機理 176 第二節　固定相 178 一、固定相的分類 178 二、固定相保留特性及選擇性的評價標準 188 第三節　流動相 197 一、流動相的組成 197 二、流動相對保留值和選擇性的影響 197 三、流動相各種影響因素的圖示方法 205 第四節　靜電排斥親水作用液相色譜 207 參考文獻 209 第六章　疏水作用鍵合相色譜法第一節　疏水作用液相色譜的分離原理 211 一、蛋白質結構特點 212 二、疏水作用機理 212 三、兩親作用色譜 213 第二節　固定相 214 一、固定相載體 214 二、疏水配位體 215 第三節　流動相 215 一、流動相的組成 215 二、影響HIC分離選擇性的因素 216 第四節　疏水作用色譜的應用 217 一、疏水作用色譜的操作過程 217 二、蛋白質混合物的分離 218 參考文獻 219 第七章　梯度洗脫第一節　基本原理 221 一、等度洗脫 221 二、梯度洗脫 222 第二節　影響梯度洗脫的各種因素 224 一、梯度洗脫時間（tG）對分離的影響 224 二、梯度陡度（T）對保留值的影響 224 三、強洗脫溶劑組分B濃度變化範圍（Δφ）的影響 225 四、柱溫變化對保留值的影響 227 五、梯度洗脫程式曲線形狀的影響 228 六、流動相流速（F）對梯度洗脫的影響 229 七、色譜柱死體積（Vm）對梯度洗脫時間（tG）的影響 231 八、色譜系統的滯留體積（VD）對梯度洗脫時間（tG）的影響 231 第三節　優化梯度洗脫的方法 232 一、建立梯度洗脫方法的一般步驟 232 二、梯度洗脫中的實驗條件 234 第四節　梯度洗脫的圖示方法 237 一、二元溶劑梯度洗脫 237 二、三元溶劑梯度洗脫 238 三、四元溶劑梯度洗脫 240 四、用極座標和球面座標描述梯度洗脫 241 參考文獻 243 第八章　高效液相色譜法的基本理論第一節　表徵液相色譜柱填充性能的重要參數 245 一、總孔率 246 二、柱壓力降 246 三、柱滲透率 247 第二節　高效液相色譜的速率理論 247 一、影響色譜峰形擴展的各種因素 248 二、範第姆特方程式的表達及圖示 251 第三節　諾克斯方程式 252 一、描述色譜柱性能的折合參數 252 二、諾克斯方程式 253 三、諾克斯方程式在表面多孔粒子（SPP）填充色譜柱中的應用 255 第四節　色譜柱的指令引數、“無限直徑” 效應和柱外效應 257 一、三個柱指令引數的運算式 257 二、“無限直徑”效應 257 三、柱外效應 259 第五節　分離阻抗和動力學圖 261 一、分離阻抗 261 二、動力學圖 262 第六節　超高效液相色譜 269 一、超高效液相色譜的理論基礎 269 二、實現超高效液相色譜的必要條件 271 三、超高效液相色譜的特點、現狀及在快速和超快速液相色譜分析中的應用 277 四、HPLC和UHPLC之間的方法轉換 284 第七節　高效液相色譜分離條件的優化 291 一、色譜參數的分類 291 二、色譜參數的相關性 291 三、色譜分離條件優化標準的選擇 292 四、色譜分離條件的優化方法 293 五、等度洗脫和梯度洗脫的優化圖示方法 293 六、優化HPLC分離條件的電腦輔助方法 296 參考文獻 297 第九章　微柱液相色譜法第一節　方法簡介 299 一、微型柱的分類 300 二、微柱液相色譜法的優點和缺點 301 第二節　基本理論 302 一、柱外效應 302 二、管壁效應 305 三、稀釋效應 307 四、分離阻抗 308 第三節　儀器裝置 308 一、輸液泵系統 309 二、進樣系統 310 三、柱系統 314 四、檢測器系統 315 五、連接管和接頭 318 第四節　微柱的製備 319 一、評價微柱性能的重要參數 320 二、影響微柱分離效率的相關參數 321 三、微柱的製備方法 322 第五節　微柱液相色譜的新技術 326 一、納米液相色譜技術 327 二、填充毛細管柱超高壓液相色譜技術 335 參考文獻 343 第十章　二維高效液相色譜法第一節　描述分離體系效能的參數 345 一、峰容量 345 二、信息量 347 第二節　二維高效液相色譜的技術功能 348 一、切割功能 349 二、反沖洗脫功能 350 三、痕量組分的富集功能 350 第三節　二維高效液相色譜的流路系統 350 一、多通路切換閥 351 二、流路系統 351 第四節　二維高效液相色譜在蛋白質組學研究中的應用 357 第五節　二維高效液相色譜在食品分析中的應用 368 一、離線全二維高效液相色譜分析藍莓中的色素 369 二、線上全二維高效液相色譜分析脂肪酸三甘油酯 370 三、線上全二維高效液相色譜分析紅辣胡椒中的類胡蘿蔔素和類胡蘿蔔素酯 371 四、線上全二維高效液相色譜分析天然抗氧化劑中的有效成分 371 參考文獻 372 第十一章　高效液相色譜新技術進展第一節　整體色譜柱 374 一、聚合物整體柱 375 二、矽膠整體柱 378 第二節　綠色流動相 383 一、超熱水流動相 384 二、其他綠色流動相 387 第三節　剪切驅動色譜 387 一、儀器構成及操作方法 388 二、固定相、流動相和分析實例 390 第四節　超高效合相色譜 391 一、超高效合相色譜方法原理簡介 391 二、超高效合相色譜儀的結構特點 394 三、超高效合相色譜儀的性能特點 398 參考文獻 402 第十二章　建立高效液相色譜分析方法的一般步驟和實驗技術第一節　樣品的性質及柱分離模式的選擇 405 一、樣品的溶解度 405 二、樣品的分子量範圍 406 三、樣品的分子結構和分析特性 406 第二節　分離操作條件的選擇 412 一、容量因數和死時間的測量 412 二、色譜柱指令引數的選擇 413 三、樣品組分保留值和容量因數的選擇 414 四、相鄰組分的選擇性係數和分離度的選擇 414 第三節　高效液相色譜法的實驗技術 416 一、溶劑的純化技術 416 二、色譜柱的裝填技術 416 三、色譜柱的平衡、保護與清洗、再生技術 420 四、梯度洗脫技術 425 五、色譜柱前和柱後的衍生化技術 426 六、樣品的預處理技術 428 參考文獻 437 符號表 439