生物化學實驗

《生物化學實驗》共設置49個實驗，分為45個基礎性實驗及4個綜合性實驗，基礎性實驗以實用性強、重複性好為編寫原則；綜合性實驗以操作規範並兼顧優選性為教學目的，融合了生物化學發展中的多種實驗方法及技術。本實驗教材內容涵蓋了生物化學研究中常用的技術和方法，從糖類、脂質、蛋白質、核酸、酶、維生素、生物氧化等幾大類展開具體實驗，附錄部分對實驗室常用緩衝溶液及其配製方法進行了介紹。

本教材適合應用型本科院校生物科學、生物技術、生物工程、生態學、農學等專業學生作為教材使用；也可為其他相關專業學生或實驗室工作人員提供參考。

第一章 緒論 1
一、生物化學實驗須知 1
二、實驗室常用知識介紹 7
三、生物化學實驗室常用儀器的使用 8
四、生物化學實驗常用實驗方法 17

第二章 糖類 35
實驗1 糖的呈色反應和還原糖的檢驗 35
實驗2 還原糖和總糖的測定(3，5-二硝基水楊酸比色法) 42
實驗3 粗纖維的測定 46
實驗4 多糖的提純與鑒定 49

第三章 脂類 53
實驗5 粗脂肪含量的測定 53
實驗6 血清中甘油三酯的測定(GPO-PAP酶法) 56
實驗7 油脂碘價的測定(Hanus法) 59
實驗8 食用油脂酸價和過氧化值的測定(滴定法) 63
實驗9 血清總膽固醇的測定(鄰苯二甲醛法) 67
實驗10 血清膽固醇的定量測定(磷硫鐵法) 70

第四章 蛋白質 73
實驗11 蛋白質的顏色反應與沉澱反應 73
實驗12 蛋白質的等電點測定 77
實驗13 聚丙烯醯胺凝膠等電聚焦電泳測定蛋白質的等電點 80
實驗14 酪蛋白的製備 85
實驗15 蛋白質含量的測定(雙縮脲法) 87
實驗16 考馬斯亮藍染色法定量測定蛋白質 89
實驗17 紫外吸收法測定蛋白質濃度 92
實驗18 蛋白質含量測定(凱氏定氮法) 94
實驗19 BCA法測定蛋白質含量 98
實驗20 氨基酸的分離鑒定(紙色譜法) 100
實驗21 血清蛋白質醋酸纖維素薄膜電泳 104
實驗22 聚丙烯醯胺凝膠電泳分離血清蛋白 109
實驗23 葡聚糖凝膠色譜使蛋白質脫鹽 114
實驗24 間接ELISA測定抗體的效價 118

第五章 色素與維生素 123
實驗25 柱色譜分離色素 123
實驗26 維生素C的定量測定(2，6-二氯酚靛酚滴定法) 127

第六章 酶 131
實驗27 酶的啟動、抑制作用 131
實驗28 酶的專一性 134
實驗29 溫度、pH值對酶活力的影響 137
實驗30 肝臟轉氨酶(穀丙轉氨酶)活力的測定 140
實驗31 超氧化物歧化酶的提取及酶活性測定 145
實驗32 過氧化氫酶活性的測定(碘量法) 149
實驗33 苯丙氨酸解氨酶的純化及活性測定 152
實驗34 聚丙烯醯胺凝膠電泳分離血清LDH同工酶 157
實驗35 血清GPT測定(賴氏法) 160
實驗36 鹼性磷酸酶的分離提取及比活力的測定 163
實驗37 凝膠過濾色譜純化鹼性磷酸酶 169
實驗38 DEAE-纖維素柱色譜純化鹼性磷酸酶 172

第七章 核酸 175
實驗39 質粒DNA的提取及定性定量測定 175
實驗40 酵母RNA的提取及組分鑒定 178
實驗41 定磷法測定核酸含量 181
實驗42 植物基因組DNA提取(CTAB法) 184
實驗43 肝組織中核酸的提取和鑒定 187

第八章 生物氧化 191
實驗44 肌糖原的酵解作用 191
實驗45 脂肪酸的β-氧化作用———酮體的生成及測定 194

第九章 綜合性實驗 199
實驗46 小麥萌發前後澱粉酶活性的比較 199
實驗47 尿素酶的製備及其生物學性質的研究 203
實驗48 用正交法測定幾種因素對酶活力的影響 208
實驗49 激素對血糖濃度的影響 213

附錄 217
Ⅰ實驗室常用緩衝溶液及配製方法 217
Ⅱ實驗報告範本 229

參考文獻 235